실험 Q&A Mol. Biol.-RNA > Purification/Isolation
RNA 260/280 Ratio 가 높게 나오는 이유
레벨5 ABOO (대학원생)
안녕하세요
현재 혈장으로부터 Extracellular vesicle을 추출하여
RNA를 측정하는 실험을 하고 있습니다.
그런데 이게 워낙 미량의 RNA가 들어있어서인지
Pellet이 안보여서 Control이 조금 힘든 부분이 있긴 한데요.
마지막 워싱할때 최대한 70% EtOH 을 조심해서 넣은다음 spin down해주고
조심스럽게 EtOH를 제거하고 dry 시켜주었습니다.
RFW같은 경우엔 10ul 정도 넣어주었구요.
그런데 A라는 샘플은 260/280Ratio가 1.43, 농도가 3.2ng/ul 정도 나왔고,
B라는 샘플은 260/280Ratio 3.35, 농도가 34.3ng/ul 정도 나왔습니다.
두 샘플의 차이는 같은 사람의 혈액이지만 혈액을 채취한 후
B 샘플은 혈장 분리하기 전에 실온에서 좀 더 장기간 놔두었습니다.
그래서 B라는 샘플에서 RNA가 적게 나올 줄 알았더니
갑자기 260/280 Ratio가 3을 넘기네요....
이 ratio가 1.95~2.0 정도가 좋은 거 아닌가요...?
3이 넘는 이유가 대체 무엇일까요...
계속해서 실험하는데 해결 방법을 모르겠습니다 ㅠㅠ
제가 나노드랍으로 측정한 결과를 첨부하도록 하겠습니다..!
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