실험 Q&A Mol. Biol.-RNA > Purification/Isolation
RNA Isolation할 때 Purity가 너무 낮게 나옵니다..
레벨5 ABOO (대학원생)
안녕하세요
제가 RNA를 분리해서 RFW에 녹인 뒤 나노드랍으로 측정을 했는데
1번 샘플은 260/280 ratio가 1.43에 농도가 186.4ng/ul 나오구요,
또 다른 문제의 2번 샘플은 260/280 ratio가 3.31에 농도가 17.8ng/ul 정도 나왔습니다.
Pellet이 아예 보이지가 않았고, 브릭에 검색해보니 RNA양이 너무 적으면 그럴 수도 있다고 해서 일단은 실험을 진행하고 측정해서 나온 결과입니다...
Pellet이 보이지 않았기 때문에, 70% EtOH로 워싱해주고, 원심분리 돌린다음에
파이펫으로 모두 빨아들이진 못하였고
클린벤치에서 1시간 30분정도 dry 시켜주었습니다.
너무 오래 말리면 RNA가 아예 녹지 않을 수도 있다고 해서
급하게 벽면에 EtOH를 파이펫으로 최대한 아래쪽 벽면에
닿지 않게 하면서 끌어올려서 제거해주긴 했는데요....
이런 경우엔 어떻게 제대로 RNA 뽑아서 농도를 측정할 수 있을까요...?
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