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레벨5
ABOO
(대학원생)
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20.07.15 17:11
안녕하세요 선생님
제가 RNA를 분리하고자 하는 액체는
키트에 있는 Solution으로 Extracellular vesicle을 서스펜션한뒤
컬럼에 분주하여 나오는 컬럼 밑으로 나오는 액체입니다.
그 안에 EV가 있을 것이라 예상되는데
Protein의 경우 0.04 ug/ul 정도 나왔구요.
제가 키트를 써서 Solution의 정확한 조성은 모르겠으나...
키트 프로토콜에는 그 안에 EV가 들어있다고 하니
RNA 농도를 한번 재보고자 합니다.
이경우도 액체에 RNA가 있는 것이 아니라 cell과 같이 특정 구조에 RNA가
들어있는 상태 이기 때문에 TRIZOL과 같이 lysis 단계가 필요할것 같습니다.
RNA가 어느정도 있을지는 추출해서 확인해 봐야 할것 같습니다.
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레벨5
ABOO
(대학원생)
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20.07.15 18:29
답변해주셔서 감사합니다
선생님 말씀대로 확인을 해보려고
실험을 진행해보았는데
Isopropanol 넣고 원심(12000g에 15분) 돌렸는데
Cell 같은 경우 하단에 뿌옇게 Pellet이 가라앉았었는데
이건 아무것도 보이지 않네요....
이런 경우엔 어떻게 하시는지 알 수 있을까요..?
Trizol 모든 단계를 진행한 후 아무것도 안보여도 dry 후 녹여서 흡광도를
측정해 보세요.