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질문 PCR 시 500-1000bp 가량의 밴드
알Nanopipet(과기인)  | 07.14 20:30
첨부파일 파일첨부: 0007.JPG (1.22 MB)
이미지 첨부파일

안녕하세요

PCR 결과에서 자꾸 나오는 큰 사이즈의 추가 밴드에 관해 질문드리고자 합니다

양 옆의 래더는 100bp짜리이고 target이 200bp 내외이므로 아래쪽의 밴드는 제대로 뜬 것이 맞는데

문제는 위쪽에 뜨는 500-1000bp 정도의 추가 밴드입니다

오랜만에 PCR을 하는지라 중간에 GLB가 다른 회사 제품으로, EtBr이 SafeView 시약으로 바뀐 상황인데 이전에는 본 적 없는 현상인 것 같아서, 혹시 dye의 문제일지요

아니면 PCR 조건(tm에 비해 1-2도밖에 낮지 않은 annealing temperature, 35 cycle, 20초의 elongation time)의 문제인지, 아니면 단순 오염인지요

특히나 맨 아랫줄 마지막의 2개는 template DNA가 들어있지 않은 blank 조건인지라 더 의심을 하고 있습니다

아시는 분은 답변 부탁드립니다 ㅠ

#PCR
 
#더블밴드
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  07.14 21:37  

template 없이 증폭된걸로 봐서는 오염으로 보입니다.

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