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 전체 > Molecular Biology-Protein > Western Blot Analysis
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질문 안녕하세요.. antibody관련해서 질문드립니다..
알pico(일반인)  | 07.13 12:30

안녕하세요 이래저래 아직 모르는게 많은 석사 1학기생입니다..

제가 이번에 protein의 expression level을 western으로 잡으려고합니다..

같은 랩실 선배님 논문에 제가 잡으려고 하는 protein의 band가 두껍게 잘 잡힌 data가 있는데 

제가 선배님 논문에 사용된 동일한 cell line에서 이 protein을 잡으면 band가 안잡히거나 거의 희미하게 잡힙니다..

졸업하신지 조금 오래된 선배님 논문이어서 논문에 사용된 antibody가 단종되어 현재 사용하고 있는 antibody가 다르다는 차이점은 있는데..

antibody의 문제라고 보기에는 transfection한 경우엔 band가 잘 생겨서 antibody의 문제는 아닐거라고 생각하지만 일단 antibody를 바꿔보려고 합니다..

혹시 브릭 선배님들께서는 이런 경우 어떤 경로를 통해서 새로운 antibody를 찾으시는지 궁금합니다.. 

제가 잡고자하는 protein을 western한 논문들을 주로 참고하시는지 아니면 주로 구매하시는 antiobody회사를 통해서 새로운 제품을 알아보시는지 궁금합니다..

작은 랩실이어서 랩실 내에 마땅히 물어볼 선배님들이 없어 항상 브릭에 많은 도움 받고있습니다 항상 감사합니다..

#antibody
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  07.13 12:52  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

항체 선택은 연구자 마다 다를건데 어떤 회사 항체를 선택하든 결과만 잘 나오면

됩니다.

target 단백질의 생산 동물과 용도에 맞는 항체라면 잘 나올겁니다.

너무 많은 sub-band가 나와서 문제지 band가 안나오는 경우는 항체 문제보다는

우선 다른 원인을 찾아 보는것이 좋을 듯 합니다.

 

올챙이Nmhyk  |  07.13 16:24  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

저같은 경우 보통 antibody를 구매할때 Reference, citation 횟수 등을 확인 합니다. 아직까지는 저 방식으로 antibody를 골랐을 때 불만족스러웠던적은 없습니다. 요즘은 대부분의 회사가 target specific antibody를 잘 만드므로 마음에 드는 회사의 antibody를 선택하시면 되지만 보통 SantaCruz 제품이 타 회사의 antibody보다 저렴하므로 저는 SantaCruz 제품을 선호하는 편입니다.

 

같은 antigen을 잡는 antibody라도 antigen 인식부위 및 binding affinity가 다르므로 western blot을 진행할 경우 antibody의 종류에 따라서 band intensity가 달라질수는 있습니다. 

도민  |  07.15 17:04   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

 

저도 윗분 처럼 인용이 많이 된 항체를 이용하는 편입니다.

개인적인 경험으로는 ABcam이나 invitrogen 항체가 퀼리티가 좋았던 것으로 기억하나, 가격대가 좀 있는 편이죠. (이 회사제품이라고 무조건적으로 더 잘 나오고 좋았던 건 아닌것 같습니다.)

 

santacruz 제품도 가격이 일단 싸서 자주 이용했었는데, santa는 진짜 복불복입니다. 잘나오는 건 진짜 잘나오고 안나오는건 죽어도 안나오더라구요 ㅠ santa제품도 인용된 수를 확인해 보고 구매하시는것이 좋을 것 같습니다.

 

CiteAB라고 원하는 단백질의 이름을 입력하면 해당 단백질 항체를 회사별, 실험별, 인용횟수별 잘 정리해 놓은 사이트가 있습니다. 참고해보시면 많은 도움이 될 것 같습니다.

 

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