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질문 트립신으로 cell 떼어낼 때
앞다리학부실험실(대학생)  | 07.08 10:36

Trypsin/EDTA를 처리하고

배양기에 3분 배양 시킨 후 동량의 배지를 첨가해준 후

살짝 피펫팅한 다음 15mL tube로 옮기고,

다시 배지 1mL로 남은 세포를 15mL tube에 옮겨주는데요..

그래도 남아있는 세포들이 있어서요..

 

남아있는 세포가 최대한 없이 회수하려면

어떻게 해야될까요??

숙련도 문제일까요??

#ㄴㄻㅎㅎ
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  07.08 11:17  

trypsin으로 detachment할 때 잘 떨어지는 cell도 있고 잘 안떨어지는 cell도

있습니다.

떨어질 때도 떨어지는 %가 모두 다르기 때문에 그때 그때 상황에 맞게

대응하면 됩니다.

떨어진 cell이 실험에 필요한 양으로 충분하다면 남아 있는 cell은 버리면 되고

최대한 회수 하려면 피펫팅으로 해결됩니다.

실험 숙련도 문제 아닌가 합니다.

ㄱㄱ  |  07.08 11:31   

배지 넣기 전에 플레이트 옆을 탁탁 쳐주거나 파이펫팅 해서 세포 떨어졌는지 확인하세요.

 

알졸업하즈아아  |  07.13 00:58  

배지가 아까울 수있는 방법일수도 잇는데 세포가 잘 안자라거나 세포 한마리라도 놓쳐선 안될 실험일 경우에 쓰는 방법입니다 

설명하자면  

예를 들어 트립신을 2ml넣었으면 incubation 한 뒤에 배지를 2ml넣어서 

파이펫팅을 해주잖아요 그럼 총 4ml를 일단 conical tube에 넣어 회수한 다음 

비어있는 플라스크에 배지를 2ml정도 더 추가해서 넣어서 파이펫팅해서 회수합니다 

윗분들 말씀대로 저도 플라스크 옆구리를 탁탁 쳐주는 것도 해요 

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