[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보  |  e브릭몰e브릭몰 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
실험 테크니션 설문결과
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
과학으로 본 코로나19 (COVID-19)
전체보기 안전점검 논문교환 LABox
 전체 > Etc.
조회 421  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 Western Blot 고수님들 부탁드립니다,, ㅠㅠ
알아에잉옹(대학생)  | 07.07 17:59

안녕하세요,, 저는 Western blot을 진행하고있는 4학년 학부생입니다.,,, 아직 스킬이 많이 부족해서 자꾸만 transfer과정에서 기포가 있습니다,, 폰슈로 확인할때 마다 보고자 하는 위치에 기포가 있어서 진행을 못하고있습니다. 어떻게 해야 기포없이 잘 할수 있을까요??

그리고 만들어 놓은 cell sample의 양이 실험을 하고나면 없을 것 같은데 이경우에는, cell을 다시 MTT부터 다 찍어보고 sampling을 해야하는건가요??

가르쳐주세요,, ㅠㅠ 정말 급하고 스트레스 받습니다,, 많이 부족하고 말주변이 없어서 이해하기 힘드시더라도 도와주시면 정말 감사하겠습니다..ㅠ

#western
 
#transfer
 
#sampling
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리BlackSmile  |  07.07 18:10  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

1. Transfer 과정에 기포가 끼이는 거는 기포 방지를 위해서 western blot용 roller를 구매하여 사용하는 것이 가장 좋은 방법이긴 합니다.

Roller를 구매하는 게 힘들다면 filter paper랑 gel, NC membrane을 겹칠때마다 plastic 재질의 납작한 도구같은 걸로 옆으로 밀면서 기포를 제거해주는 게 좋습니다.

 

2. MTT를 찍어봐야 한다는 말은 drug를 처리했을 때 cell viability에 어느정도 영향을 준다는 말인지요?

사용하는 Drug가 cell proliferation이나 cytotoxicity에 어느정도 영향을 준다면 실험을 반복하였을 때 Drug가 제대로 cell에 작용하였다는 것을 MTT assay로 확인을 하고 western을 진행하는게 좋습니다.

"일단 western을 진행했는데 나중에 알고봤더니 drug가 제대로 작용하지 않았더라" 라는 불상사를 예방하기 위해서 MTT부터 찍는게 좋을 것 같습니다.

알아에잉옹  |  07.07 18:22  

답변 정말 감사합니다,,ㅎㅎ

죄송하지만 하나만 더 질문하겠습니다,,

그러면 이전에 sampling해서 나온 western 결과와 이번에 다시 cell을 sampling해서 나온 결과를 같이 사용하면 안되는거죠?? 그전 결과는 없애고 다시한 cell line의 결과만 사용하는것이 맞는거겠죠??

개구리BlackSmile  |  07.07 18:29  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

아무래도 재실험을 진행한다면 그 data만 사용하는 것을 추천하지만,

우선 동일한 실험조건에서 western을 진행해서 얻은 data가 있다면, 반복실험을 통해 단백질 발현의 pattern이 동일하게 나타나는지 확인을 하는 게 좋습니다.

만약 동일한 결과가 나타난다면 예전 결과와 이번 결과 중 어느 data를 사용해도 문제가 되지는 않을 것 같습니다.

답변하기
할인행사 광고 검색광고
바이오디 바이오디
Wet 방식의 장점에 속도와 편리함까지 지닌 eBlot & eStain 파격 할인 (8.31까지)
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
TECAN 한국대리점 20주년 기념 할인 행사 (12.31까지)
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
nanoString & COVID-19 / 다양한 Cloning application에 적용 가능한 com... (8.27까지)
케이비티 케이비티
[KBT] Thermo Shaker, Sonicator, Mixer, Heating Block, Rotato.. (8.16까지)
브래디 브래디
초저온라벨 등 실험실용 풀칼라프린터 (COVID-19 안전사인 지원) (8.30까지)
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
[TECAN] Reading과 형광 Imaging을 하나의 장비로 한 번에!! [Multi-mode micr.. (8.31까지)
외부제휴사 광고 AD
e브릭몰
2/6  좌우
17,000
339,400322,500
47,20044,900
739,000702,100
370,000
482,000
468,000
93,20088,600
482,000
773,000734,400
493,000
143,800136,700
52,60050,000
49,000
23,000
130,500124,000
79,50075,600
92,30087,700
66,50063,200
109,000
125,500119,300
139,000132,100
6,000
136,000129,200
최근등록   더보기 >
iScript cDNA synthesis kit 사용해 보신 분 계신가요   08.10
개인이 p.acnes 분양할 수 있는 방법   08.10
CRISPR에 대하여 공부하던 중 의문점이 생겨 질문드립니다.   08.09
고등학생 생명과학 실험 추천   08.09
마스크 비말 실험 관련해서 질문해봅니다.   08.09
환원당 or 알데하이드 환원력 질의   08.09
포도당 구조(사슬형에서 고리형으로 변환 시) 질문   08.09
SELEX 용 버퍼 사용기한   08.09
연구 가치   08.09
dim=c()이 의미하는게 뭔가요? (R studio)   08.09
생화학분자생물학회
실험관련연재
박은총 연재중후배에게 주고 싶은 면역학 노트
박은총(Duke University)
신코 연재중분석장비 이야기
분석장비 탐험가 (필명) ((주)신코)
Mr.S 연재중의학계의 Spectaculum: 임상시험
Mr. S (필명) (연세대학교)
에스프리 연재중실험을 해봅시다
에스프리 (필명)
곽민준 연재중랩노트
곽민준 (POSTECH 생명과학과)
ZEUS
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ  |  실험 문의 및 제안
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의 member@ibric.org
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
머크