실험 Q&A Cell Biology > Cell Culture
cell count 고수님들 도와주세요...
레벨2 kaldose (대학생)
안녕하세요.. 세포 실험을 배우고 있는 학생입니다
헤마사이토미터로 셀카운트를 진행하였는데 구석의 큰 4개의 사각형을 셌더니 총 세포수는 260개 였습니다.
트립신 처리후 배지를 첨가하여 원심분리를 해주었고 이후에 상층액을 제거하고 배지 2 mL로 세포 펠렛을 풀어준 후 10 uL를 취하여 셀카운트를 진행하였습니다. 이때 희석배수는 어떻게 곱해주어야 하는 건지..
또 전의 실험방에서는 헤마사이토미터에 커버글라스를 올려놓고 움직이지 않게 손가락으로 끝을 살짝 눌러 고정한 후 100 uL를 주입해서 커버글라스가 움직이면 다시 세척하고 처음부터 주입했는데 이번에 들어온 실험방은 흔들려도 상관없이 그냥 세시더라고요... 혼란이 옵니다.
1. 셀카운트에서 용액 주입시 커버글라스가 흔들려도 상관 없는건지
2. 꼭 10 uL를 취해서 넣어야 하는 것인지
3. 부피가 달라지면 카운트한 세포 값도 다르게 계산해야하는지 궁급합니다...
4. 그리고 꼭 셀카운트 시 원심분리를 해야하는 이유도 궁금합니다.
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