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레벨5
BlackSmile
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20.07.02 12:20
ATCC의 RAW264.7 datasheet를 보면 scraper를 이용해서 떼어내라고 recommend되어있습니다.
RAW264.7 cell은 굉장히 민감한 세포입니다.
조그마한 stimulation에도 금방 activation이 되는 cell line이기 때문에 culture할 때 특히 조심해야합니다.
Culture하실 때 Trypsin-EDTA는 왠만하면 사용하지 않는 것을 추천합니다.
Raw cell의 detachment에 trypsin을 사용하는것이 좋은지 않좋은지에
대한 문제는 연구자 마다 의견이 많은 부분입니다.
ATCC에서는 scraper 사용이 나와있습니다만 20년 이상 cell을 키워본
경험으로는 trypsin or scraper 모두 무방합니다.
Raw cell과 같은 면역 system의 cell은 주변 환경에 자극을 잘 받습니다.
scraper 사용에 따른 물질적 힘 또한 자극으로 작용합니다.
또한 배양 중에 원인 불명으로 자극 받은 일도 종종 발생합니다.
Raw cell은 사용 빈도 대비 관리하기가 힘든 cell 중의 하나이기 때문에
detachment가 문제가 아니라 control 상태를 잘 유지하는 것이 중요하고
무처리에도 자극받은 상태로 되면 해당 cell은 폐기하고 새로운 stock을
꺼내서 배양하는 것이 좋습니다.