실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Expression/Purification
Plasmid의 발현 확인을 위한 transfection 양
레벨2 ade95a (대학생)
HEK293T 또는 Hela cell에 transfection을 통해서 plasmid expression을 시키고 이후에 western blot으로 확인하려 합니다.
보고자하는 protein은 총 3개인데 plasmid에 하나의 CMV promoter로 발현되고 있고 중간마다 T2A, P2A로 연결되어 있습니다.
Endogenous한 발현을 보는게 아니라 plasmid expression을 보는게 처음인데 보통 어느정도 양을 넣어야할까요? 1ug이면 충분할까요? 또 transfection 3d 후에 lysis를 하는게 일반적이겠죠?
답변 부탁드립니다. 감사합니다.
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