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농축 추출물 유산균 균주 접종 배양 방법 질문 드려요.
레벨1 랩실도비 (대학생)
안녕하세요. 종강을 맞아 열심히 실험실 출근 도장 찍고 있는 학부생입니다.
다름이 아니라 제가 요즘 여러 실험방법도 배워가며 계획중인 실험이 있는데, 시작하기에 정보가 부족해서 질문 올리게 되었습니다.
먼저 질문전에 간단하게 계획된 내용을 설명 드리자면, 제 소재를 활용하여 접종 배양을 하기 위해 70%EtOH로 추출후 농축기를 사용하여 농축 하였습니다.
동결건조해놓은 소재와, 동결건조하지 않고 농축만 진행해놓은것 두가지를 보관중입니다.
그중에 동결 건조하지 않은 농축결과물을 활용하여, Lactobacilllus plantarum과 monascus purpureus등을 2% 접종 배양하여 24h, 48h동안 적정 온도에서 배양하여 배양물을 가지고 항산화 활성 능력 실험을 진행하여 시간별 배양 산물과 농축물 3가지의 항산화 능력을 비교할 예정입니다.
궁금한점 질문 드리도록 하겠습니다!
1. 균주 은행에서 분양받은 앰플을 배지에 스트릭킹후 배양하여 글리세롤과 스탁하여 바이알에 넣어 디프리저에 보관중인 균을 다시 꺼내어 재사용할때의 균 배양법에 대해 알려주셨으면 좋겠습니다.
2. 본배양전에 전배양 꼭 진행 해야하는 과정인가요?? 전배양법 간략하게 적어주시면 좋겠습니다.
3. 접종량 2%로 접종할려고 하는데, 예로 1L 당 20ml 정도 접종하는게 맞는건가요? 그리고, 예시에서 말한 20ml 라는게 정확하게 어떤 것을 뜻하는 것인가요? 액체배지에서 고체배지의 single colony채취하여 배양한 배양액을 뜻하는 것인가요? 설명과 접종시키는 과정좀 가르쳐주시면 감사하겠습니다.
4. 접종한 배양액이 잘 접종되어 잘 진행 되고 있는지는 어떻게 확인할 수 있나요??
5. 배양 산물을 활용하여 항산화 실험을 진행할때 동결건조를 다시 진행하여 실험을 진행하여야 하나요, 아니면 그냥 배양액을 전처리 하지않고 그대로 사용하면 되는건가요??
이렇게 질문 드립니다. 제가 이것저것 찾아보고해도 잘 모르겠어서 질문 남기게 되었습니다. 질문이 5가지나 되어, 꽤 많아서 알고계시는 부분만 설명해주셔도 감사히 받아적고 공부하도록 하겠습니다.
긴글 읽어주셔서 감사드리고, 부디 답변과함께 노하우좀 가르쳐 주셨으면 좋겠습니다. 실험은 모두다 노하우와 센스로 진행 해야하는게 한두가지가 아닌것 같더라구요, 그래도 열심히 해보겠습니다. 질문에 답변 부탁드리겠습니다.
그리고 실험간 미흡한 점이나 추가로 보안하여서 진행해야할 실험에 대해서 말씀해주시면 감사히 참고하도록 하겠습니다.
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