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밑의 사진 lane 설명이 어떻게 되나요?
그리고 위의 사진 전체 gel 사진은 없나요?
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레벨1
김유니
(대학원생)
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20.06.29 17:24
윗사진 젤 사진은 저게 전부입니다ㅠ잘려진 부분은 59도로 진행한 같은 넘버링이구, 같은 모양새에요ㅠ
윗사진은 조건잡을 당시의 사진이라 sample number1,2입니다!
아랫사진은 1번lane size marker, 2번 lane sample number2(positive),
3번 lane sample number 3(망한 number)입니다!
positive sample도 살짝 맛이 가려고 하는것 같은데 primer 한번 점검해보십시오. stock으로 보관하고 있는게 있다면 새로 푸는 것을 추천합니다.
이외에는 원칙적으로 가능한 문제와 해결은
2. tissue 녹이는 용액의 상태 확인 또는 교체
3. PCR에 사용하는 polymerase 및 기타시약 상태 확인 또는 교체
일거 같네요
ladder 잘 나오므로 gel은 괜찮다고 가정하고요..
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레벨5
CHINyo76_philekorea
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20.06.30 17:44
동일한 조건이라면 template 문제일 수 있습니다.
template 농도 체크 후 template 농도를 줄여서 PCR을 진행하시는 것도 고려해보세요.
실험 조건에 대해 좀 더 명확하게 말해주셔야 제대로된 답변이 가능할 것 같아요~
샘플이 tissue에서 gDNA를 뽑은 후 PCR했다는 것 같은데,
gDNA를 얼마를 넣은 것인지
ledder의 각 band의 size가 몇인지
예상 product size가 몇인지,
위 사진과 아래 사진은 같은 template 샘플을 사용한 것인지,
template DNA 보관한지는 얼마나 된건지 등이 주로 있어야 할 것 같습니다.
저도 일단 드릴 수 있는 조언은 template 넣는 양을 다양하게 해서 진행해보는걸 추천드려요