[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보  |  e브릭몰e브릭몰 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
실험 테크니션 설문결과
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
과학으로 본 코로나19 (COVID-19)
전체보기 안전점검 논문교환 LABox
 전체 > Molecular Biology-Protein > Expression/Purification
조회 211  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 DH5a와 DH10b 차이가 많이 나나요?
알동동동__(대학원생)  | 06.23 11:18

안녕하세요 cloning을 하고 있는 대학원생입니다.

 

저는 다른 랩에서 cloning을 배우고 있는데 transformation이 안되서 질문 드립니다.

 

제가 원하는 protein을 얻어야해서 교수님께서 DH10b를 electroporation으로 transformation하라고 하셨고 그렇게 계속해서 시도 했는데 전혀 콜로니가 생기지 않았습니다.

이 cell은 제가 배양해서 stock으로 만들어 놓았기 때문에 혹시나 cell이 문제인가 싶어서 다시 만들어보기도 하고 아무것도 없는 vector만 넣어보기도 했는데 그때는 또 콜로니가 잘 생겼어요.

혹시나 ligation이나 enzyme cut 문제인가 싶어서 랩에 있는 RBC DH5a를 사용해서 transformation을 해봤는데 당황스러울 정도로 콜로니가 잘 떴습니다.

두 cell이 차이가 많이 나나요? DH5a cell datasheet에는 protein 발현에는 사용하지 않는게 좋다고 하던데 bric에서는 발현은 시킬수 있다는 글을 보았습니다. DH5a를 가지고 protein 발현을 시켜도 괜찮을까요?

 

감사합니다

#DH10b
 
#DH5a
 
#cloning
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리강시  |  06.23 13:30  
저는 이젠 DH5a대신 DH10B/r만 사용합니다.
두 균주간에 별 차이가 없어서요.
특히 DH10B/r은 phage에 내성이 있어서 혹시나 모를 phage 오염에 대비하는 의미도 있고해서.....
DH5a는 단백질 발현에 사용하기도 하지만 제약이있습니다.
pET 계열 벡터처럼 T7 polymerase를 서묭할 수 없으며, pGEX 계열의 lac promoter나 tac promoter 를 사용하는 벡터만 사용할 수 있습니다.
그러나 BL21 처럼 ptotease negative 균주가 아니어서 단백질 발현에는 사용이 꺼려집니다.
답변하기
할인행사 광고 검색광고
바이오디 바이오디
Wet 방식의 장점에 속도와 편리함까지 지닌 eBlot & eStain 파격 할인 (8.31까지)
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
TECAN 한국대리점 20주년 기념 할인 행사 (12.31까지)
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
nanoString & COVID-19 / 다양한 Cloning application에 적용 가능한 com... (8.27까지)
케이비티 케이비티
[KBT] Thermo Shaker, Sonicator, Mixer, Heating Block, Rotato.. (8.16까지)
브래디 브래디
초저온라벨 등 실험실용 풀칼라프린터 (COVID-19 안전사인 지원) (8.30까지)
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
[TECAN] Reading과 형광 Imaging을 하나의 장비로 한 번에!! [Multi-mode micr.. (8.31까지)
외부제휴사 광고 AD
e브릭몰
1/6  좌우
109,000
49,000
468,000
47,20044,900
17,000
93,20088,600
482,000
493,000
79,50075,600
125,500119,300
52,60050,000
136,000129,200
739,000702,100
130,500124,000
23,000
92,30087,700
773,000734,400
482,000
143,800136,700
339,400322,500
6,000
370,000
66,50063,200
139,000132,100
최근등록   더보기 >
iScript cDNA synthesis kit 사용해 보신 분 계신가요   08.10
개인이 p.acnes 분양할 수 있는 방법   08.10
CRISPR에 대하여 공부하던 중 의문점이 생겨 질문드립니다.   08.09
고등학생 생명과학 실험 추천   08.09
마스크 비말 실험 관련해서 질문해봅니다.   08.09
환원당 or 알데하이드 환원력 질의   08.09
포도당 구조(사슬형에서 고리형으로 변환 시) 질문   08.09
SELEX 용 버퍼 사용기한   08.09
연구 가치   08.09
dim=c()이 의미하는게 뭔가요? (R studio)   08.09
과학기술정보통신부
실험관련연재
박은총 연재중후배에게 주고 싶은 면역학 노트
박은총(Duke University)
신코 연재중분석장비 이야기
분석장비 탐험가 (필명) ((주)신코)
Mr.S 연재중의학계의 Spectaculum: 임상시험
Mr. S (필명) (연세대학교)
에스프리 연재중실험을 해봅시다
에스프리 (필명)
곽민준 연재중랩노트
곽민준 (POSTECH 생명과학과)
ZEUS
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ  |  실험 문의 및 제안
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의 member@ibric.org
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
머크