실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Expression/Purification
DH5a와 DH10b 차이가 많이 나나요?
레벨1 동동동__ (대학원생)
안녕하세요 cloning을 하고 있는 대학원생입니다.
저는 다른 랩에서 cloning을 배우고 있는데 transformation이 안되서 질문 드립니다.
제가 원하는 protein을 얻어야해서 교수님께서 DH10b를 electroporation으로 transformation하라고 하셨고 그렇게 계속해서 시도 했는데 전혀 콜로니가 생기지 않았습니다.
이 cell은 제가 배양해서 stock으로 만들어 놓았기 때문에 혹시나 cell이 문제인가 싶어서 다시 만들어보기도 하고 아무것도 없는 vector만 넣어보기도 했는데 그때는 또 콜로니가 잘 생겼어요.
혹시나 ligation이나 enzyme cut 문제인가 싶어서 랩에 있는 RBC DH5a를 사용해서 transformation을 해봤는데 당황스러울 정도로 콜로니가 잘 떴습니다.
두 cell이 차이가 많이 나나요? DH5a cell datasheet에는 protein 발현에는 사용하지 않는게 좋다고 하던데 bric에서는 발현은 시킬수 있다는 글을 보았습니다. DH5a를 가지고 protein 발현을 시켜도 괜찮을까요?
감사합니다
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