실험 Q&A Cell Biology > Differentiation/Proliferation
Transwell migtarion assay 질문입니다.
레벨1 ㅎㅅㅇ (대학원생)
안녕하세요 Transwell assay 를 처음 해 보는 대학원생입니다.
Matrigel을 코팅해서 하는 Invasion 말고, migration을 확인 하고 싶어서 시도하였는데 문제가 많습니다 ㅠㅠ
저희 실험실에 있는 프로토콜이 따로 없어서, 혼자 여러 논문을 참고해서 시도 해 보았는데 결과가 계속 안 나와서 질문 드립니다...!
이렇게 프로토콜을 만들어서 실험 중인데, 우선 세포 자체가 migration이 안 되는것 같아요 ㅠㅠ 분명 챔버 윗 부분에 세포들이 있는것을 확인 후에, Fixing이랑 staining 단계를 진행하는데 염색 후에 보면 아무것도 남아있질 않습니다..ㅠㅠ 세포 이동속도가 느려서 그런가 해서 1주일동안 방치해도 똑같습니다 ㅠㅠ
다른 분들께 여쭤봐도 프로토콜상에는 큰 문제가 없다고하는데.. 여러가지 바꾸어 봐도 변화가 없습니다..
실험에 사용한 세포는 HepG2 이고, 챔버 pore size는 8.0 um 입니다.
제일 중요한 실험인데 지금 확인조차 안 되는 상황이라 너무 답답합니다 ㅜㅜ
Transwell asaay 고수님들 제발 도와주세요 ㅠㅠㅠㅠㅠ
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