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Sirna powder dilution 실수
레벨1 caroline1 (대학원생)
안녕하세요 siRNA sense, antisense를 각각 powder형태로 구입했습니다. annealing시키는 과정에서 DEPC에 녹여야하는데 제가 tube를 혼동해서 5X duplex annealing buffer에 powder를 녹였습니다. 그리고 두 용액을 합친 후 90도에서 annealing을 진행하였습니다.. 지금은 -20도씨에 보관중인데 이 siRNA 사용은 못하겠죠...? 그리고 5X에 녹였다는걸 깨닫고 남은 5x버퍼에 녹인 annealing 하지 않은 sense,antisense(녹인 후 RT 한시간 있었음)용액에 DEPC를 추가하여 버퍼농도를 1x로 만들고 annealing(90도) 하였습니다. 이 siRNA도 사용 불가할까요.. 현재 -20도씨 보관중입니다. annealing buffer의 조성은 30 mM HEPES-KOH pH 7.4, 100 mM KCl, 2 mM MgCl2, 50 mM NH4Ac 입니다. 살릴 수 있는 방법은 없을까요.. 도와주세요.....
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