실험 Q&A Cell Biology > Viability
MTT protocol DMSO concentration
레벨1 esl123 (대학원생)
안녕하세요.
이번에 새로 대학원에 진학한 학생입니다.
다름이 아니라 이번에 MTT assay를 처음으로 진행하게 되었습니다.
protocol상에서 12 well plate에 50,000cells/well의 농도로 cell seeding후 24시간동안 배양한뒤, 암실 조건에서 MTT solution을 각 well당 1ml씩 넣었습니다.
그 후 4시간동안 인큐베이터에 넣고 MTT solution을 석션한뒤 PBS로 세척하는 과정을 거쳤습니다.
여기서 MTT formazan을 녹이기 위해서 DMSO를 1ml넣었는데요. 따로 희석하는 과정 없이 그대로 1ml를 넣었습니다.
다른 글들을 찾아보니 DMSO의 독성으로 인해서 0.1%~1%로 넣어야 된다고 나와있었습니다.
저희 랩에서의 방식과 다르다보니 DMSO를 희석해서 사용하는것에서부터 의문이 생겻습니다.
여기서 제 질문은 100% DMSO를 사용하면 결과값은 나오지만 신뢰성이 떨어지게 되는 결과인가요?
참고로 각 con의 O.D.값은 평균 0.4로 나오게 되었습니다.
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