실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > Gene Cloning
ligation 후 제한효소 처리 후 질문드립니다 ㅠ
레벨5 해징 (대학원생)
안녕하세요. 신생 랩 석사과정 학생입니다.
혼자서 클로닝을 하다보니 여쭤볼 사람이 없어 질문글 올리게 되었습니다.
왼쪽은 제 insert (4.65 kb), pet23d (3.6 kb)를 ligation 후 플라스미드를 뽑아 EcoR1으로 원컷한 전기영동 결과입니다. 그리고 사이즈 마커 옆은 플라스미드 프랩한 것을 같이 걸어준 것 입니다.
대략 8 kb 위쪽으로 밴드가 있는데 그 아래에 또 밴드가 있어서..
혹시나 ta cloning 후 제한효소 처리하고 gel extraction할 때 t 벡터가 남아있어서 같이 나올 수는 없는거겠죠..?
사이즈가 얼추 t 벡터 (3.8 kb)와 비슷해보여서요 ㅠ
insert+pet23d ligation 후 프랩한 플라스미드를 T7, T7 ter로 시퀀싱 맡겼는데 시퀀스는 정확하게 나왔거든요 ㅠ...
안 잘린 플라스미드같지도 않고 도대체 저게 무엇인지 모르겠습니다..
고수님들 제발 저 좀 도와주세요 ㅠㅠㅠ
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