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 전체 > Immunology > ELISA
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질문 Elisa 답답한 마음에 여쭤봅니다..
올챙이뱌쿠(대학원생)  | 06.03 17:02

ELISA 실험을 스탠다드만 테스트로 해 본 후

본 실험을 진행하고 있습니다.

첫 번째 테스트에서 스탠다드가 나왔고

두 번째 본 실험에서 샘플과 스탠다드가 아예 나오지 않았습니다.

다시 두번째로 스탠다드만 테스를 했을 때 스탠다드가 나왔고 오늘 두 번째 본실험을 하였는데 스탠다드조차 나오지 않았습니다. 

버퍼 등 만들어 쓰는 시약도 동일했고 

시약 순서는 외우고 있었고 헷갈리지 않았습니다..

지금 생각해 볼 수 있는 변수로는

 

1. 워싱 할 때 본 실험은 여러 플레이트를 한 번에 해서 워싱 버퍼에 오래(15분 가량)있는 동안 결합이 떨어졌다

2. HRP 붙이는 과정에서 원래 RT 1시간 조건인데

RT 1시간 후 4도씨에 30분 정도 두었다가 다시 실험을 진행 한 것이 영향을 주었다

3. plate coating시 냉장고가 아닌 콜드 룸에 보관한 것이 냉장도에 비해 충분히 고르고 낮은 온도를 유지 하지 못하였다

 

이 정도인데..이 중 엘라이자가 아예 안 나오는 이유가 될 수 있는 것이 있을까요? 샘플을 날려서 넘 속상하네유..

#ELISA
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
올챙이BlackSmile  |  06.03 18:31  

Buffer는 실험을 할때마다 만들어쓰시나요? 아니면 다량을 만들어놓고 실험을 진행하시나요?

알chmaeng91  |  06.03 18:38  

스탠다드만을 사용한 실험과 본실험을 각각 두번씩 진행했는데 두번 모두 본실험에서는 아예 결과가 나오지 않은 것인가요?

 

말씀하신 3가지 변수중에서 가장 가능성이 높은 것은 1번이라고 생각됩니다.

2번이나 3번의 경우 실험 결과가 아예 나오지 않을 정도의 영향을 주지는 않을 것입니다.

 

올챙이뱌쿠  |  06.05 20:17  
네, 버퍼는 500ml씩 만들어쓰고,
그 날 만든 새 버퍼로 먼저 테스트를 한 번 한 후그 다음날 같은 버퍼를 사용해 본 실험을 진행하였습니다.
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