실험 Q&A Immunology > ELISA
Elisa 답답한 마음에 여쭤봅니다..
레벨2 뱌쿠 (대학원생)
ELISA 실험을 스탠다드만 테스트로 해 본 후
본 실험을 진행하고 있습니다.
첫 번째 테스트에서 스탠다드가 나왔고
두 번째 본 실험에서 샘플과 스탠다드가 아예 나오지 않았습니다.
다시 두번째로 스탠다드만 테스를 했을 때 스탠다드가 나왔고 오늘 두 번째 본실험을 하였는데 스탠다드조차 나오지 않았습니다.
버퍼 등 만들어 쓰는 시약도 동일했고
시약 순서는 외우고 있었고 헷갈리지 않았습니다..
지금 생각해 볼 수 있는 변수로는
1. 워싱 할 때 본 실험은 여러 플레이트를 한 번에 해서 워싱 버퍼에 오래(15분 가량)있는 동안 결합이 떨어졌다
2. HRP 붙이는 과정에서 원래 RT 1시간 조건인데
RT 1시간 후 4도씨에 30분 정도 두었다가 다시 실험을 진행 한 것이 영향을 주었다
3. plate coating시 냉장고가 아닌 콜드 룸에 보관한 것이 냉장도에 비해 충분히 고르고 낮은 온도를 유지 하지 못하였다
이 정도인데..이 중 엘라이자가 아예 안 나오는 이유가 될 수 있는 것이 있을까요? 샘플을 날려서 넘 속상하네유..
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