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질문 세포 동결할 때 vial당 몇 만씩 넣으시나요?
알도와줘요살려줘요(대학생)  | 06.02 12:59

저는 이전 선배한테 1vial에 동결액 1mL, 세포 30만이라고 배웠는데

실험실 질소탱크에 저장된 vial 꺼내보면 1mL에 100만, 최대로는 200만이 들어있는 경우도 있네요

이번에 새로운 세포주를 받아왔는데 그곳에서도 1mL에 100만 씩 넣어서 주더라고요

다른 분들은 보통 얼만큼 넣나요?

그리고 2mL vial인데 꼭 1mL씩만 넣어서 쓰는 이유가 있을까요?

#동결
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
올챙이=ㅅ=  |  06.02 16:29  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

 

1. 꽉 채워서 넣으면 뚜껑에 묻는다든지 그럴 확률이 높아집니다.

물론 뚜껑이 오염되지는 않았겠지만, 손으로 직접 잡는 부위는 뚜껑이니까요.

그러한 이유로 stock 만들고 거꾸로 들거나 기울여서 뚜껑까지 닿게 하지는 않습니다.

이 외에도 여러가지 이유가 있을 수도 있겠지만, 적어도 저는 이런 이유 때문에

1ml만 넣습니다.

대신 이런 이유이기 때문에 웬만해서는 1ml 씩 넣지만, stock이 조금 더 남으면 1ml에 추가로 더 넣기도 합니다. 1.2ml, 1.3ml 이런 식으로요..

 

2. 세포는 서로 간에 커뮤니케이션을 하는 녀석들이라,

세포숫자가 너무 적으면 급격하게 생존율이 떨어집니다.

(모르겠습니다.. 추운데 친구들이 없어서 외로워서 더 잘 죽는 것일수도..)

반면 세포숫자가 너무 많으면 또 살기 힘들다고 죽습니다.

그래서 적정량의 세포숫자를 넣는 것이 중요합니다.

무조건 세포 1ml 당 ~~ 마리 이런 것은 아닙니다.

어떤 세포주는 크기가 작고 어떤 세포주는 크기가 크고..

그런데 이러한 세포들의 특징을 고려하지 않고

같은 부피 속에 같은 숫자를 넣고 살라고 하기에는

세포에게 가혹한 일일 것 같습니다.

세포실험한지 조금 되어서 기억은 잘 안나지만

recomand 된 세포 수가 아마 있을 것입니다.

 

아, 그리고 꼭 이런 이유때문에 세포수를 결정하는 것이 아니기도 한데요,

만약 이 세포가 귀중하거나 (계대수가 적다든지..비싸다던지..),

잘 자라지 않아 stock vol이 애초에 얼마 없거나,

오염을 더 주의해야 하는 세포이거나,

폭발적으로 자라는 세포라 그정도만 풀어도 괜찮거나.. 이러면

엘리컷을 더 나누어서 할 수도 있을 것 같습니다.

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