사진은 배양 몇일 째인가요?
사진을 보면 2종류의cell이 보입니다.
하나는 SH-SY5Y이고 나머지는 SH-SY5Y가 죽어가는 처음부터 다른 cell인지
알수 없습니다.
현재 잘 부착되어 있는 SH-SY5Y도 조금 더 배양하면 죽나요?
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레벨5
지나가는사람
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20.06.01 15:45
선생님 안녕하세요.
제 메일로 연락 가능한 연락처 보내주세요~
같은 cell line 을 연구하는 사람으로써
제가 보유중인 SH-SY5Y cell line 보내드리겠습니다.
SH cell 에서 처음보는 형태라... 아무래도 폐기하셔야될 것 같습니다.
zk61326@naver.com
여기로 연락처 보내주세요 !
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레벨1
50195
(대학생)
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20.06.01 16:15
@SPEED 님 배양한 지 일주일 지난 셀입니다 중간에 media는 계속 갈아 주었고요 저런 형태로 변하다가 나중에는 떨어져 버립니다 ㅠㅠ 처음에는 잘 붙어 있었는데도 불구하고 3 일 정도 지나면 점점 떨어지기 시작하네요...
셀이 컨디션 유지 못하고 변형되면서 사멸해서 뜨는 것 같네요.
sub culture가 늦어지는 경우 오버그로스 되어 세포가 변형이 일어나고 이후에 sub culture를 하여도 저렇게 셀이 변형되면서 그 이후 일정시간 자라다 뜨는 경우가 많습니다.
프레시한 세포로 다시 받아서 실험 해보셔야 할 것 같네요.
그리고 일주일 자란게.. 저정도 밖에 안되면... 처음에 까실 때도 셀 농도 잘 체크해서 푸셔야 할 것 같네요.
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학생신분
(비회원)
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20.06.03 16:33
우선 SH-SY5Y cell은 adherent/suspension 의 성질을 반반 가지고 있습니다.
또한 neuroblastoma 이지만, bone marrow에서 culture가 되었고,
dopaminergic neuron의 성질을 보일 수도 있습니다.
그렇기 때문에, 간혹 trypsin을 사용을 하지 않고, subculture를 하기도 하며,
syringe를 이용하기도 합니다.
위 상태는 적은 양의 culture로 인하여,
분화가 진행된 상태라고 보시면 됩니다.
dopaminergic neuron으로의 분화를 시키기 위한 여러 방법이 있지만,
위 사진의 상황은 DN 분화는 아니고,
대부분 cell이 겹쳐 자라면서 adherent의 성질 및 cell의 성질을 잃어 버리는,
불특정 분화 (애매하지만...)가 일어난다고 보시면 됩니다.
Subculture는 half/half로 culture를 하시는게 좋고,
passage no.는 30 (문헌에서는 최대한 20)을 넘기지 않는 것이
좋다고 하는 cell 입니다
작은 size의 culture dish에서 배양한 후 (density는 50%정도),
population이 가득 찼을때,
반반 식 culture하며 늘려 나가시길 추천드립니다.