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 전체 > Cell Biology > Cell Culture
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질문 셀 컨탐 같은데 뭔지 알 수 있을까요?
알50195(대학생)  | 06.01 14:45
첨부파일 파일첨부: [크기변환]KakaoTalk_20200601_143425969_01.jpg (1.23 MB)
이미지 첨부파일

SH-SY5Y 셀입니다 이 셀 말고도 다른 셀들도 마찬가지인데 사진에서 보이는 것처럼 뭉치거나 시간이 지나면 다 떨어져 버립니다 ㅠㅠ 이것 때문에 실험을 진행하지 못하고 있는데 뭐 때문에 이런 건지 알 수 있을까요...? 혹여 해결 방법도 있으면 알려 주세요 부탁드립니다 ㅠㅠ

#contamination
 
#컨탐
 
#cell
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  06.01 15:17  

사진은 배양 몇일 째인가요?

사진을 보면 2종류의cell이 보입니다.

하나는 SH-SY5Y이고 나머지는 SH-SY5Y가 죽어가는 처음부터 다른 cell인지

알수 없습니다.

현재 잘 부착되어 있는 SH-SY5Y도 조금 더 배양하면 죽나요?

개구리지나가는사람  |  06.01 15:45  

선생님 안녕하세요.

제 메일로 연락 가능한 연락처 보내주세요~

같은 cell line 을 연구하는 사람으로써

제가 보유중인 SH-SY5Y cell line 보내드리겠습니다.

SH cell 에서 처음보는 형태라... 아무래도 폐기하셔야될 것 같습니다.

zk61326@naver.com

여기로 연락처 보내주세요 !

알50195  |  06.01 16:15  

@SPEED 님 배양한 지 일주일 지난 셀입니다 중간에 media는 계속 갈아 주었고요 저런 형태로 변하다가 나중에는 떨어져 버립니다 ㅠㅠ 처음에는 잘 붙어 있었는데도 불구하고 3 일 정도 지나면 점점 떨어지기 시작하네요...

dd  |  06.02 15:26   

셀이 컨디션 유지 못하고  변형되면서 사멸해서 뜨는 것 같네요.

 

sub culture가 늦어지는 경우 오버그로스 되어 세포가 변형이 일어나고 이후에 sub culture를 하여도  저렇게 셀이 변형되면서  그 이후 일정시간 자라다 뜨는 경우가 많습니다.

 프레시한 세포로 다시 받아서 실험 해보셔야 할 것 같네요.

 

그리고 일주일 자란게.. 저정도 밖에 안되면... 처음에 까실 때도 셀 농도 잘 체크해서 푸셔야 할 것 같네요.

학생신분  |  06.03 16:33   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

 

 우선 SH-SY5Y cell은 adherent/suspension 의 성질을 반반 가지고 있습니다.

 또한 neuroblastoma 이지만, bone marrow에서 culture가 되었고, 

 dopaminergic neuron의 성질을 보일 수도 있습니다.  

 

 그렇기 때문에, 간혹 trypsin을 사용을 하지 않고, subculture를 하기도 하며, 

 syringe를 이용하기도 합니다. 

위 상태는 적은 양의 culture로 인하여, 

분화가 진행된 상태라고 보시면 됩니다.

dopaminergic neuron으로의 분화를 시키기 위한 여러 방법이 있지만, 

위 사진의 상황은 DN 분화는 아니고, 

대부분 cell이 겹쳐 자라면서 adherent의 성질 및 cell의 성질을 잃어 버리는,

불특정 분화 (애매하지만...)가 일어난다고 보시면 됩니다. 

 

Subculture는 half/half로 culture를 하시는게 좋고, 

passage no.는 30 (문헌에서는 최대한 20)을 넘기지 않는 것이

좋다고 하는 cell 입니다 

 

작은 size의 culture dish에서 배양한 후 (density는 50%정도), 

population이 가득 찼을때, 

반반 식 culture하며 늘려 나가시길 추천드립니다. 

 


 

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