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 전체 > Molecular Biology-DNA > Gene Cloning
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질문 miniprep screening 결과 분석
올챙이Uu225(대학생)  | 05.29 15:15
첨부파일 파일첨부: 77.PNG (456 KB)
이미지 첨부파일
보통 screening 결과로 plasmid DNA pMB02 나 pMB03이 나오게 되면 전기영동 band size가 4.9정도로 하나가 나와야 하는데, 3.6~2.6 정도가 나오면 제대로 나오지 않게 된건가요?
그렇다고 하기에는 결과가 다 너무 고르게 나와서 이 점이 궁금합니다.
#screening
 
#miniprep
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리무광  |  05.29 15:27  

주어진 결과와 정보만 보면 원하시는 plasmid는 안나온 것 같습니다.

올챙이Uu225  |  05.29 15:48  
그럼 miniprep과정은 제대로 되었지만 screening이 잘 안된것일 수도 있나요??
대왕개구리SPEED  |  05.29 15:55  

MB02, MB03이 어떤 pasmid인지 모르겠지만 TF 후 어떤 방법으로 selection

했나요?

아니면 plasmid selection에 대한 간략한 실험 개요에 대하여 설명이 있으면

좋을 듯 합니다.

개구리무광  |  05.29 15:58  

plasmid는 있으니 prep은 된 것 같습니다.

pMB03/EcoR1으로 표기된 lane들에는 밑 쪽에 밴드가 하나 더 있네요
6번째 lane도 있고

지금 말씀하시는 screening은 정확히 어떻게 하셨나요?
ligation을 하신 뒤 insert가 들어갔나 무작위로 colony 고른 뒤
prep해서 확인하시는 중인가요?
empty plasmid의 크기는 몇 bp인가요?

올챙이Uu225  |  05.29 16:44  
miniprep 진행 후 그 실험의 plasmid를 가지고 screening을 진행했습니다.
miniprep 때는 결과가 제대로 나온것 같은데 screening에서 확인해보니 size가 생각했던것보다 달라서...
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