실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Western Blot
western antibody selection 관련하여 질문드립니다!
레벨1 초보연구 (대학원생)
안녕하십니까 선생님들!
제가 최근에 western blot을 세팅하고 있습니다.
제가 사용하는 세포는 CHO cell line입니다. CHO cell의 특정단백질(편의상 A라고 하겠습니다.)을 잡는 1차 antibody를 구입하고자 하는데 아무래도 CHO cell 용으로는 A를 잡는 antibody가 출시되지 않아서 human A or mouse A 용 antibody를 구입하고자 합니다.
판매사 홈페이지에 있는 A를 잡는 antibody의 epitope 아미노산 서열에 따라서 human A와 chinese hamster A의 아미노산 sequence를 비교하였을 때 완전히 일치하는 부분이 있습니다. (human A의 100~200 아미노산 서열이 epitope라고 하면 CHO cell A의 90~190아미노산이 human A의 100~200과 정확히 일치)
1) endogenous protein western blot을 할 때 human이나 mouse cell을 사용하지 않는 경우에는 선생님들께서는 어떻게 antibody를 고르시는지
2) 아미노산 서열을 비교해서 antibody를 고르는 방법이 맞는 것인지
에 대해서 알고 싶습니다.
랩에서 처음 세팅하는 것이라 western의 원리부터 공부하고 있습니다만 antibody가 아무래도 고가의 소모품이다보니 신중하게 선택하고 싶어서 질문을 드립니다.
긴 질문 읽어주셔서 감사합니다!
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