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 전체 > Molecular Biology-DNA > Gene Cloning
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질문 miniprep screening 결과 분석
올챙이Uu225(대학생)  | 05.27 17:32
첨부파일 파일첨부: 77.PNG (456 KB)
이미지 첨부파일
보통 plasmid DNA pM02이나 pMB03이 나오면 band가 하나 나와야 하는 걸로 알고 있는데, 밑에 번지게 나온 부분은 뭘 뜻하는 건지 궁금합니다.
#miniprep
 
#screening
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리강시  |  05.27 18:38  
RNA로 보입니다.
올챙이Uu225  |  05.27 18:41  
screening 했을 때 RNA가 나와도 상관 없는 건가요?
대왕개구리강시  |  05.27 20:25  

RNA가 나와도 결과를 방해하지 않으면 상관 없습니다.

단지 젤 사진을 논문에 넣거나 보고서에 넣을때 좀 안이쁘다 정도입니다.

하지만 젤사진에 보면 7번 시료는 EcoRI으로 잘랐으니 100bp 밴드가 나와야 하는데 100bp 밴드 위치에 RNA가 잔뜩 있어서 밴드의 존재가 확인되지 않습니다.

8번 시료는 양이 적어서 100bp  밴드가 너무 희미한게 흠입니다.

Plasmid를 정제할 때 Sol 1에 RNase를 넣어주거나 최종 plasmid를 추출해서 DW에 녹일때 DW에 RNase를 소량(대충 0.5 -1 ul 정도?) 넣어주면 RNA 문제는 해결됩니다.

그것도 안되었다면 제한효소 반응시킬때 RNase를 넣어줘도 됩니다.

올챙이Uu225  |  05.28 00:57  
한가지 더 궁금한게 있는데 pMBO2 이나 pMBO3이 결과로 나오려면 전기영동 band size가 4.9kb 정도가 나와야하는데, 위의 결과는 모두 잘못나온 결과인 건가요?
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