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 전체 > Molecular Biology-DNA > Transformation
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질문 e.coli 전기영동 결과인데 모르겠습니다.
알팔탄농부(대학생)  | 05.27 15:30

ladder control EcoR I BamH I doublecut 순서의 결과입니다.

프로토콜에 14~16시간 배양이라고 했는데 23시간 배양 후 실험하였는데 

그게 큰 이유일까요??

upload_image

실험 방법은 고체배지(항생제 有)에 배양시켜 콜로니를 얻어 그것을 다시 pipet으로 액체배지에 풀어서 재배양 시켜 덩어리형성된 걸 풀어주고 70 ml 정도를 centrifuge해서 pellet을 10 ml 배지로 다시 현탁시킨 후 실험 진행하였습니다.  Kit protocol 대로 진행하였는데 제한효소 protocol에 보니까 균 배양 시간이 13~16시간이더라고요 혹시 다른문제가 있는지 여쭙고자 이렇게 질문드립니다.

고체배지 20시간(형질전환 e.coli sellect용)

+ 액체배지 재배양 23시간 으로 총 43시간 배양하였는데 혹시 처음부터 액체배지에 배양을 하는 것이 맞는 방법인가요???? 

많은 답변 부탁드립니다 감사합니다!!

#E.coli
 
#전기영동
 
#DNA
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리강시  |  05.27 18:44  
대장균 배양시간은 큰영향없습니다.
특히 키트로 정제했으면 12시간 배양하든 23시간 배양하든 plasmip prep 과 cut은 괜찮습니다.
사진의 Plasmid의 크기가 얼마인지, 각 호소로 자르면 어느 크기의 밴드가 몇개가 나와야하는지 정보는 있나요?
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