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 전체 > Cell Biology > Transfection
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질문 miRNA mimic transfection관련 질문
알HMMTS(대학원생)  | 05.27 15:27

현재 miRNA mimic 2종류를 각각 lipofectamine 2000으로 transfection하여 세포 내 miRNA 양을 늘려 그 효과를 보는 실험을 진행하고 있습니다.

동일 miRNA를 동일한 양으로 동일한 cell에 처리하는 과정을 3차례 진행하였을 때, 한 종류는 2.5~15배 증가, 다른 한 종류는 10~40배 증가하는 결과가 나왔습니다. 증가량 변동이 너무 커서 이를 균일하게 할 방법을 찾고자 하는데 의견을 주시면 감사드리겠습니다.

실험을 진행할 때 여유분을 계산하지 않고 실험하여 transfection reagent solution 양이 매 차례 약간 차이가 있었던 점이 문제가 되었을 수도 있어 이부분은 개선할 계획입니다.

#miRNA
 
#transfection
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
지나가다..  |  05.28 13:09   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

Transfection은 원래 편차가 큰 실험입니다. 

특히 효율에 가장 큰 영향을 미치는게 cell의 density, 세포의 passage, Transfection Reagent와 miRNA 비율, 이런것들로 인해 차이가 많이 발생합니다. 

 

따라서, 결과를 안정적으로 내려면, Seeding 당시 좋은 상태의 세포를 최대한 동일하게 깔고, 정해진 protocol에 따라 실험하는 것입니다. 그 이외에 방법은 단적으로 말씀드리면 없습니다. 

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