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질문 세포 배양 질문있습니다
알SHINNNNNN(대학원생)  | 05.27 13:21

안녕하세요! 세포 키우기 시작한지 이제 1년 좀 된 대학원생입니다...

다른게 아니고 WI 38 세포를 키우고 있는데 이게 생각만큼 잘 자라지 않아서 세포 갯수가 항상 부족하더라고요... 그래서 많이 자랄때까지 계대를 안하려고하는데 media change는 한 dish에서 몇번까지 해도 괜찮을까요?? 그리고 change 주기는 이틀에 한번정도면 괜찮을까요?

지금 media는 DMEM으로 사용하고 있습니다

#WI38
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리무광  |  05.27 17:54  

세포간 접촉으로 분화 등의 변화가 일어나는 cell line이 아니라면 괜찮습니다.

제가 직접 키워보지 않아서 찾아보니 WI38은 normal fibroblast네요.

꽉 차기전에 계대하시면 될 것 같습니다. 

Guide에는 doubling time이 하루, subculture는 1:2 ~ 1:6사이 비율을 권장하니, dish당 1/4~1/5 정도로 계대하시면 되겠네요.
immortalized cell line이 아니니 남는건 passage number를 기록해 stock으로 저장해두시구요.

medium change는 1주일에 2-3번이라고하니 2일이나 3일에 한 번씩
애초에 1/4~1/5로 계대하면 2-3일마다 passage를 해야 할 겁니다.

ATCC에선 EMEM + 10% FBS가 권장인데, 거기에 추가로
1% NEAA (non essential amino acids) 를 넣으라는 cell bank도 있네요. 

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