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질문 단백질 refolding 관련하여 조언을 구합니다.
알밥술이(대학원생)  | 05.26 11:02

안녕하세요. 현재 석사과정 중에 있는 대학원생입니다.

조언을 구하고자 글을 올립니다.

제가 현재 8M urea를 이용하여 단백질 정제를 진행하였구요.

이제 urea를 이용하여 dialysis 를 통해 단백질을 refolding 해야 하는 과정에 있

습니다. 제가 궁금한것은.

Q1: 몇몰의 Urea 부터 dialysis를 진행하는 것이 좋나요?

- 저는 4M,3M,2M,1M,0.5M,0M 순으로 진행을 하였었는데. 다른 몰수에서는 단백질이 원하는 밴드에 떴는데 0M 에서 단백질이 나오지 않아서 실패했습니다.

 

Q2: dialysis를 진행하는 buffer의 양은 어느정도가 적당한가요? 너무 많아도 안된다고 알고있는데 저는 1L의 buffer로 진행을 하였습니다. 그결과 자꾸 단백질이 aggregation되더라구요...

 

Q3: dialysis를 진행하는 시간은 어느정도가 좋을까요? 저는 4시간 또는 over night으로 진행을 하였었습니다.

 

이밖에도 refolding 에 관한 조언을 해주시면 좋겠습니다. ㅠㅠ 

제가 잘 몰라서 엄두가 나질 않습니다ㅠㅠ 답변해주시면 감사드리겠습니다.

#단백질 refolding
 
#Urea
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