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질문 키우던 세포에서 박테리아가 자란 원인을 모르겠습니다.
뒷다리Arkadis(대학생)  | 05.25 09:28
첨부파일 파일첨부: noname01.jpg (27 KB)
이미지 첨부파일

1달가까이 세포를 키우고 있는데요..

첫 실험에서 ampicillin만을 섞은 배지에서 곰팡이가 자라 추가로 amphotericin B를 구매해 섞어서 키웠습니다.

3주차가 지날때쯤 갑자기 두 개의 T-flask 중 하나에서 E.coli같은 박테리아가 급격하게 발현했습니다.

완전히 같은 환경에서 배지 교체와 분주 등이 진행된 T-flask이기에 배지 오염이나 cell 오염은 아니라고 생각되는데요..

feedback을 위해서 원인을 규명해야 하는데 제 짧은 지식으로는 짐작이 가지 않습니다.

실험 과정중의 오염이라고 하기에는 짐작이 가지 않을 뿐더러, 오염된 T-flask가 먼저 작업을 진행하던 아이이기에 나중에 작업한 아이가 멀쩡한 부분이 걸립니다.

급작스럽게 오염이 될만한 이유가 뭐가 있을까요?

첨부한 사진은 폐기직전, 발현 2일차에 찍은 사진입니다.

#배지오염
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  05.25 10:44  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

오염은 외부 요인으로 배지에서 미생물 오염은 항상 일어날 가능성이 있기

때문에 주의해야합니다.

눈에 보이지 않기 때문에 정확한 오염 경로를 파악하기 힘듭니다.

따라서 오염되면 가능성 있는 모든 것을 소독하는 것이 가장 좋은 방법입니다.

뒷다리Arkadis  |  05.25 11:09  

분주나 배지교체 등 모든 실험은 clean bench 내부에서 이루어 졌고 기구들은 전부 autoclave 돌린지 얼마 되지 않은 기구에 실험 전후로 UV소독 30분씩 실시하고 있으며, 실험직전에도 EtOH 소독까지 꼼꼼히 하고 모든 출입품들도 EtOH 소독 했는데도 저렇게 되니 눈물을 머금고 보내준 다음 전체 재소독 했습니다...

심지어 동시진행한 다른 아이는 아무런 문제가 없는데다가 민감한 cell이라서 최대한 주의한다고 했는데도 저렇게 되어버리니 어느 부분이 미흡한지 파악이 안 돼서 어디서 더 신경을 써야 하는지, 어디서 실수가 발생한 건지 감도 안 잡힙니다...

대왕개구리SPEED  |  05.25 11:36  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

원래 정확한 원인을 모르기 때문에 실험에 사용한 모든 것을 소독을 합니다.

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