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 전체 > Molecular Biology-Protein > Western Blot Analysis
조회 225  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 낮은 protein 양
올챙이juyu21(대학원생)  | 05.23 16:55

western blot을 하기 위해

cell을 cytosol과 membrane으로 fraction 후

bradford assay로 정량하였습니다

그런데 추출한 단백질양의 흡광도값 - blank값을 계산하니

마이너스가 나왔습니다. 아무래도 단백질량이 작아서 그런것 같은데

새로 세포를 키우는 방법 외에 이 시료를 쓸 수 있는 다른 방법은 없을까요?

#protein assay
 
#western blot
 
#bradford
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  05.23 17:10  

현재 상태에서는 WBT에 필요한 최소 양으로 농축 후 정량해보는 것이좋을 듯

합니다.

올챙이juyu21  |  05.23 17:16  

답변 감사합니다.

농축 후 정량하는 방법도 알려주실 수 있으실까요?

대왕개구리SPEED  |  05.23 17:26  

기존에 하던 방법으로 정량하면 됩니다.

올챙이juyu21  |  05.23 17:49  
혹시 농축하는 방법도 알려주실 수 있나요?
대왕개구리SPEED  |  05.23 21:38  

가장 효율 좋고 단백질 구조에 문제가 없게 농축하는 방법은 동결건조입니다.

그 다음에는 speed-vac, 목적 단백질 분자량에 따라 사용가능할수도 있고

사용하지 못할수도 있지만 유기용매-protein down and washing, dissolving 방법이

있습니다. 

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