실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
RT PCR 유전자발현 원리? 가 궁금한데요
레벨2 초보연구인 (대학생)
식물에 고온에 내성이있는 약품을 처리하고 처리구랑 대조구의 cdna를 합성하여 rt pcr을 이용해 유전자발현 차이를 알아보는 실험을 하고 있습니다 1.프라이머 (고온에 내성이 있다고 알려진 유전자 서열) 를 제작하여 각각 처리구와 대조구에 넣어준후 (레퍼런스 유전자는 18rRNA 를 쓰고 있어요) rt pcr을 돌려주잖아요 근데 그걸로 대조구와 처리구의 고온 내성 유전자 발현차이를 어떻게 알 수 있는건지 설명 해주실 수 있을까요? 피씨알은 dna를 대량 증폭 시켜주는건데 이걸로 어떻게 안다는건지 자료를 찾아봐도 잘 모르겠어요 2.pcr 에서 대량 증폭시 프라이머의 역할은 타겟 dna에서 특정 서열을 (고온내성 작용을 하는 특정부분) 찾아 거기만 증폭시키는 건가요? 예를들어 (attatatatatac포워드 프라이머)ccataactgggatagcatgaagtacgtagtttagccagatgaagctagactattagatagatagacccagataccagataca(cttagactaga리버스프라이머)의 염기서열을 가진 프라이머를 제작했으면 결국 pcr산물은 타겟 dna에 포워드와 리버스 프라이머와 결합해 저것과 똑같은 염기서열을 증폭 시켜주는건가요? 아무리 책을 봐도 이해가 잘안돼서 질문 남겨요 ㅠ
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