실험 Q&A Laboratory Animals > Histology/Pathology
쥐소장 파라핀 절편염색방법 좀 알려주세요ㅜㅜ
레벨1 ain (과기인)
안녕하세요 병리학실험을 처음하는 학생입니다.
다름이 아니라 소장을 파라핀절편을 해야되는데 계속 결과가 안나와서 질문을 드립니다...
교수님께서 소장을 swiss rolling으로 하는걸 원치 않으시고 통으로 하거나 열어서 하시기를 원하십니다...
Q. 소장을 연다면 호일에 펴서 고정을 시켜야하죠??
아니면 다른 방법이 있을까요??
Q.통으로 하면 구겨져서 나오는데 안구겨지게 나오게 하는 방법이 따로 있을까요??
그럼 소장안에 관같은 걸 집어 넣나요?? 그렇다면 뭘 집어넣나요??
Q.저희는 자동처리기를 1시간씩 넘어가는걸로 설정했는데 너무 오래 처리하나요??
제가 찾아본 과정은
While tissue is in the cassette, rinse tissue with PBS until fixative is completely removed.
Dehydrate tissue using ethanol in the following sequence: 50% ethanol for 10 min, 70% ethanol for 10 min, 80% ethanol for 10 min, 95% ethanol for 10 min, 100% ethanol for 10 min, 100% ethanol for 10 min, and 100% ethanol for 10 min.
Exchange ethanol with xylene in the following sequence: 2:1 ethanol : xylene for 10 - 15 min, 1:1 ethanol : xylene for 10 - 15 min, 1:2 ethanol : xylene for 10 - 15 min, 100% xylene for 10 - 15 min, 100% xylene for 10 - 15 min, and 100% xylene for 10 - 15 min. CAUTION: Xylene is a health hazard, thus the workplace should be equipped with a local exhaust ventilation with a proper hood and the proper protective equipment should be wore by personnel.
Exchange xylene with paraffin. Perform the following steps in a vacuum oven set for 54 - 58 °C: 2:1 xylene : paraffin for 30 min, 1:1 xylene : paraffin for 30 min, 1:2 xylene : paraffin for 30 min, 100% paraffin for 1 - 2 hr, and 100% paraffin for 1 - 2 hr or overnight. Note: Do not let the paraffin exceed 60 °C for prolonged periods of time because this will degrade the paraffin polymers and make it hard and brittle. 이겁니다.
근데 자동처리기는 12개 통밖에 없는데 보통 자동처리기를 사용할 때도 이렇게 하나요??
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