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레벨5
어쩌구저쩌구
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20.05.19 16:17
PCR에서 중요 포인트는
1. Primer: pair가 잘되는 primer를 이용해야 합니다. 길이가 너무 짧은 경우 문제가 될 수 있습니다. 보통 20mer 근처를 많이 사용합니다. 사용 양도 확인 해 보시기 바랍니다.
2. 온도: Primer와 DNA의 annealing이 잘 되는 온도를 찾아야 합니다. 특히, 내가 원하는 부위에만 붙을 수 있게 하는 것이 좋습니다. 지저분하다면, 온도를 약간 높여 보는 것도 좋습니다.
한 번 해봐서 안되면 annealing temp를 조정해 보세요.
이도 저도 귀찮으면 gradient PCR을 해 보세요.
젤을 좀 더 destaining 하세요.
애초에 ladder도 잘 안보이는 거 보니깐 <br />
<br />
PCR 도 그렇고<br />
gel, 전기영동, dye-staining에도 문제있는 것 같은데요.<br />
<br />
어떻게 하셨는지 정보가 없으니 구체적 조언은 못드리겠고<br />
이 쪽 실험계획을 재검토해보세요.
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지나가다..
(비회원)
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20.05.21 14:13
뭐라 드릴 말씀이 없습니다.
실험 방법도 없고, 레더도 안보이고..
그냥 PCR 결과 잘안나오는데 잘 나오는 방법 알려달라니요..
본인이 실험한 내용에 대해서 기록하는 습관부터 가지세요.
연구노트요.