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질문 PCR 밴드가 안 보임.
앞다리동물사랑 *^^*(과기인)  |  05.19 15:42
첨부파일 파일첨부: 20200519_151625~2.jpg (1.54 MB)
이미지 첨부파일
PCR 깨끗하게 나오는 법

보다시피 밴드가 깔끔하게 나오지 않았습니다.

PCR 잘 하는 팁 좀 알려주세요.ㅠㅠ
#PCR
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리어쩌구저쩌구  |  05.19 16:17  

PCR에서 중요 포인트는

1. Primer: pair가 잘되는 primer를 이용해야 합니다. 길이가 너무 짧은 경우 문제가 될 수 있습니다. 보통 20mer 근처를 많이 사용합니다. 사용 양도 확인 해 보시기 바랍니다.

2. 온도: Primer와 DNA의 annealing이 잘 되는 온도를 찾아야 합니다. 특히, 내가 원하는 부위에만 붙을 수 있게 하는 것이 좋습니다.  지저분하다면, 온도를 약간 높여 보는 것도 좋습니다.

대왕개구리강시  |  05.19 19:08  
한 번 해봐서 안되면 annealing temp를 조정해 보세요.
이도 저도 귀찮으면 gradient PCR을 해 보세요.

젤을 좀 더 destaining 하세요.
개구리무광  |  05.19 20:54  

애초에 ladder도 잘 안보이는 거 보니깐 

PCR 도 그렇고
gel, 전기영동, dye-staining에도 문제있는 것 같은데요.

어떻게 하셨는지 정보가 없으니 구체적 조언은 못드리겠고
이 쪽 실험계획을 재검토해보세요.

지나가다..  |  05.21 14:13   

뭐라 드릴 말씀이 없습니다.

실험 방법도 없고, 레더도 안보이고.. 

그냥 PCR 결과 잘안나오는데 잘 나오는 방법 알려달라니요.. 

 

본인이 실험한 내용에 대해서 기록하는 습관부터 가지세요. 

연구노트요. 

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