실험 Q&A Cell Biology > Cell Culture
Competent cell을 만드는 과정에 대해 문의드립니다!
레벨1 꿈냥이 (대학원생)
안녕하세요!
현재 E,coli에서 원하는 gene을 발현시키는 실험을 하고 있는 대학원생입니다.
전에 cloning관련 질문을 올렸는데 많은 분들의 조언덕분에 cloning에 성공할 수 있었습니다! 감사해요.
co-transforamtion이 잘 되지 않아 하나의 vector를 미리 삽입한뒤 c.cell을 만들어 transformation을 진행하려 합니다. ( 두 vector의 origin도 모두 확인하였습니다.)
기질vector에 여러 mutant를 넣어 발현을 비교하는 실험이라 기질 vector를 넣은 c.cell을 만드려합니다.
Bric 및 여러곳에서 찾아보니 BL21의 경우 CaCl2방법에서 효율이 더 좋다하여 protocol을 데이터를 모아 정리해 보았습니다. 혹시 수정해야할 부분이 있을지 한번 봐주실 수 있으신가요?? 감사합니다!
제가 만들 c.cell의 E.coli strain은 BL21입니다.
Material
Procedure
The day before:
The next day:
Bio마켓 프리미엄