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 전체 > Molecular Biology-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
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질문 qPCR의 결과 그래프를 보던 중 궁금한 점이 생겨 질문드립니다.
알hoit(대학생)  |  05.18 10:06

학교에서 Q-PCR에 대해 배웠는데 궁금한 점이 생겼습니다.

PCR에서 cycle이 증가할 때마다 표적 DNA의 양이 지속적으로 증가한다고 배웠는데, 그렇기에 저는 PCR을 수행할 때 cycle이 무한대로 설정되면 copy수 또한 무한대로 증가하리라고 예상을 했었습니다.

그러나 Q-PCR의 결과 그래프를 보니 copy 수가 특정 양에 도달하게 되면 더 이상 증가하지 않고 거기서 cycle을 더 진행하더라도 그 값 그대로 유지되는 양상(그림 속 검정 동그라미 부분)을 볼 수 있었습니다. 이런 양상이 나타나는 이유가 무엇인가요?

그 이유를 알게 되면 PCR 학습에 큰 도움이 될 것 같아 질문을 남깁니다. 

 

upload_image

#Q-PCR
 
#copy수 한계
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
알kmary2  |  05.18 11:13  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.
PCR product를 만드는 dNTP가 소모가 되기때문에 더이상 Copy수가 늘어나지 않습니다.
앞다리CHINyo76_philekorea  |  05.18 11:54  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

 DNA polymerase이 고온에서도 사용할 수 있으나 reaction cycle이 증가할 수록 실활 및 증폭단편(주형DNA)의 증가로 인한 효소분자와 주형DNA 비율의 부족이 나타나며, 증폭단편간의 annealing 되는 속도 증가로 primer의 anneal과 경쟁이 나타날 수 있습니다. 그리고 Pyrophosphate 축적으로 인한 효소반응 저해가 나타날 수 있습니다. pyrophosphate의 경우 Mg2+이온과 높은 친화력으로 PCR 반응에 요구되는 Mg2+ 이온과 결합하여 DNA 중합효소의 활성을 억제시킬 수 있습니다.

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