실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Extraction/Isolation
Ni-NTA 칼럼에 샘플 로딩할 때의 질문입니다.
레벨5 클레엉 (대학원생)
저희 연구실에서 기존에 내려오던 방법은 lysis 후 소니케이션 해서 깨주고 lysate 를 12000rpm에서 40여분 centrifuge 후 0.45um syringe filter 로 filteration 해준 후 칼럼에 로딩을 하는 방식이었습니다.
근데 최근에 lysate 가 centrifuge 후에도 좀 끈적..? 거리는 현상이 발생하여 필터가 잘 되지 않는 현상이 자주 발생하고 있습니다.
혹시 이러는 이유를 알 수 있을까요?
이를 해결하기 위해서는 무엇을 해야하나요? 그리고 꼭 0.45um 필터는 필수적인가요?
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