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레벨2
연구원지망생
(대학원생)
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20.05.15 09:25
전기영동 후 transfer 전에 marker가 위에는 아예 안 보이고 밑에만 흐릿하게 보였어요.....
WBT 후 안보이는 것이 아니네요.
전압문제는 아니고 gel 문제 아니면 marker 자체 문제일 겁니다.
전기영동 문제는 사진이 있어야 하고 말로 설명해서는 원인을 정확히
알수 없습니다.
sample band는 정상적으로 나왔나요?
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레벨2
연구원지망생
(대학원생)
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20.05.15 11:19
제가 결과사진을 올리고 다시 판단해 주실 수 있나요???
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레벨2
연구원지망생
(대학원생)
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20.05.15 11:47
죄송해요.. 제가 깜빡하고 저장을 못해서요ㅜㅜㅜ 제가 사진을 찍어봤는데 샘플은 band가 하나도 안 떴어요... 이건 gel 자체의 문제일 까요???? 그냥 검은색으로 다 떴어요ㅠㅠㅠㅠㅠ
이건 저번껀데요... 이번에는 밴드가 안 뜨고 아예 다 까맣게 보였어요...
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레벨2
연구원지망생
(대학원생)
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20.05.15 13:54
사진 다시올려요ㅠㅠ
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레벨2
연구원지망생
(대학원생)
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20.05.15 16:36
이건 저번에 꺼구요.... 이번꺼는 이런 밴드조차 안 뜨고 다 까맣게 보여요ㅠㅠㅠ
gel 자체의 문제일까요???
먼저 촬영에 문제가 없는 사진을 봐야지 알수 있을 것 같습니다.
그나마 보이는 band를 보면 gel에 문제가 있을 것으로 보입니다만..
직접 만든 gel인가요? 아니면 구매한 gel인가요?
pre-stained marker인가요? 그러면 내리는 동안에 그리고 다 내린다음에 size marker가 보여야 합니다. staking gel 지나면서 size marker가 분리되는 것이 보여야 한다는 말입니다.
사진을 봐서는 분간이 되지 않네요..SDS-PAGE가 아니라 DNA gel 같아 보여요...
참 그리고 전극이 바로 된것은 맞나요? 그럼 아래로 내려가는게 아니라 위로 올라가서 샘플이 다 빠져 버립니다..
전 보통 120v로 내리는데 12% SDS-PAGE의 경우는 2시간 걸어도 아무 문제 없습니다.
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레벨1
vetkim
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20.05.19 11:05
혹시 gel conentration이 얼마였나요?
위에 분이 말씀해주신대로 전극이 반대로 되어있거나
hand made gel인 경우에는 만드실 때 제대로 안섞어주시면 BNE 하시는 것처럼 농도 경사가 생겨서 밴드가 안보일수도 있을 것 같습니다.
또 하나는 웨스턴 장비들 사용하시고 DW로 마지막에 세척 하시나요? 안그러면 전해질이 쌓여서 문제되는 경우도 있더라구요.