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cell을 tube에 모아서 trizol을 처리하는게 좋습니다.
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레벨5
클레엉
(대학원생)
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20.05.01 13:32
엇 그렇다면 scraper 로 셀을 모아줄 때 PBS 상태에서 워시해야하나요? trizol 프로토콜에서는 워시하지말고 바로 trizol 처리하라고 되어있어서요!
washing하는 것이 total RNA quality에 좋습니다.
trizol을 처리하면 mRNA를 포함한 total RNA가 추출됩니다.
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레벨1
Q.E.D.
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20.05.03 12:53
제 경우는 96well 이여서 스크래퍼를 못
썻었는데, 6well이면 충분하겠네요.
전 200p tip으로 앞으로 긁고
그걸로 그대로 모았거든요ㅋㅋ
부착 세포의 경우 세포 배지를 제거 후
한 번 PBS로 워싱하고 완전히 제거 후
트리졸을 well 면적 대비로 넣어주고
실험을 하면 됩니다.
스크래퍼는 well당 새걸로 사용하세요.
많이 쓸 것 같으면 1000p tip 뒤로 긁고
버리고 새걸로 모으시던가용~