실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > Purification/Isolation
Plasmid DNA preparation 질문
레벨1 myday6 (대학원생)
안녕하세요.
Plasmid DNA preparation 중 isopropanol에 elution하여 centrifuge 후 침전된 DNA pellet 을 EtOH washing 하는 단계에서
70% EtOH가 아닌 100% EtOH를 사용하였습니다.
원래대로라면 pellet이 유지되어야하는데 100% EtOH를 넣자마자 DNA pellet이 풀어졌습니다.
왜 이렇게 되는건지 찾아보니 Salt가 없고 EtOH의 농도가 높으면 DNA pellet의 물분자가 빠져나간다는데 이와 관련이 있나요? 아니라면 왜 이렇게 되는 건지,
DNA를 다시 centrifuge 하고 washing하여 pellet을 얻을 수 있었는데 정상적인 pellet과 달리 더 하얗고 불투명해졌습니다. 70% washing하여 사용해도 되는지 알고싶습니다.
조언 부탁드립니다.
감사합니다.
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