실험Q&A를 통해 여러분의 지식을 나누어 주세요. 답변을 등록하시려면 로그인 해주세요.
본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
액체질소로 들어가기까지의 동결보존 과정이 어떻게 되나요? 얼릴 땐 천천히 얼려야 합니다.
-
레벨1
bunny
(대학원생)
-
20.04.10 11:38
저희가 사용하는 deepfreezer가 -63℃ 정도 인데 짧게는 2~3일 길게는 몇달까지 보관 되있었고 액체질소가 들어오기 전에는 풀어주었을 때도 잘자랐습니다.
액체 질소로 옮긴 지는 7일 정도 되었습니다.
지금 deepfreezer에 얼린지 2일 정도된 세포도 붙지 않고 있습니다...
저희의 deepfreezer의 온도에서 액체질소 온도사이의 gap이 너무 큰 것이 문제일까요?
세포 보관할 때 freezing container에 넣고 -80℃에서 하루 보관 후 액체 질소로 옮기는 방법 혹은 cell banker 같은 제품을 썼다면 별도의 컨테이너 없이 deepfreezer에서 쭉 보관하는 방법이 있습니다.
deepfreezer에서 얼린 후 액체 질소로 옮기는 것이 세포에 문제를 끼쳤다고 생각이 되지는 않습니다.
-
해브어굿타임
(비회원)
-
20.04.10 17:14
ice chamber에 넣어서 deep freezer에 하루 놔뒀다가
액체질소에 넣어서 보관합니다.
바로 액체질소 넣으면 세포가 망가진다고 들어서요 ㅎㅎ
예전에도 똑같이 해서 세포가 잘 자랐다면
이번에 무슨 처리를 잘못해서 세포가 다 죽은게 아닐까 생각해봅니다.
DMSO, FBS, 배지 양을 잘못 넣었다던가 해서
동결보존 과정에 큰 문제가 있어보이진 않네요.
세포가 붙지 않고 다 죽어있던가요?
가끔 thawing 하였을 때 부착세포가 부착하지 않고 크는 것을 본 적이 있습니다. 배양액 모아서 다른 flask로 옮겨주니 잘 붙어서 자랐습니다.
-
레벨1
bunny
(대학원생)
-
20.04.16 10:48
답변해 주셔 감사합니다.
지금 모든 세포를 다 풀었는데
1~2개 vial 만 살아있고 나머지는 부착이 안되고 다 죽었습니다.
말씀해 주신 것 처럼 액체질소로 옮겼다고 해서 죽지 않는다면
deepfreezer에 보관당시 온도의 문제 혹은 기타 문제로 이미 죽었을 것 으로 예
상 합니다.