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세포에 sample 처리하는 방식에 대해
레벨1 살려주세요1234 (대학원생)
안녕하세요. 1년차 석사과정을 하고있는 대학원생입니다.. sample에 대한 약리활성을 in vitro 수준에서 보고 있습니다. 3T3-L1 cell을 키우고 있구요. sample을 DMSO에 녹여서 0.5 % 처리를 하는데요. 6 well 기준 2 mL 배지를 넣어주는데, 0.5 %니까 10 uL sample을 넣어줍니다. sample을 cell에 처리할때 어떤 방식으로 하시나요? 1. media에 섞어 처리 2. Cell에 직접 처리 media에 섞어 처리한다는 것은 2 mL media에 sample 10 uL를 넣고 섞은 후에 Cell에 분주하는 것이고 Cell에 직접 처리한다는것은 2 mL media를 먼저 cell에 분주하고 그 cell에 10 uL sample를 바로 넣어주는 것입니다. 하지만 직접처리하게 되면 처리된 부분의 바로 아래 cell들이 다 죽어버립니다. 아무리 천천히 넣어줘도 cell이 뜨거나 죽는걸 방지하긴 어려웠습니다. DMSO가 처리되면서 well 바닥에 가라앉는게 보이는데 Well 안에서 파이펫팅은 할 수 없을뿐더러, 8자로 plate를 흔들어 섞어도 배지에 섞어처리하는 것보단 균일하게 섞이는거 같지도 않습니다. 그러나, 교수님께서 cell에 직접처리하는 것을 더 원하시는터라.. 그래서 보통은 어떻게 처리하는게 일반적인지 여쭙고싶습니다..
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