저는 HeLa cell을 이용해서 Facs analysis 하는데 1 well만으로 facs 한 번 찍기는 부족합니다. 3well은 합쳐야  facs tube 한개로 만들기 충분합니다..

PI staining하는거보면 cell cycle까지 보는건데 그러면 cell collect 당시 cell confluency가 중요합니다. collect 당시 ~60% confluency가 되도록하는게 좋고, facs 분석할때는 3x10^5~1x10^6세포가 필요합니다. 

[아이스티]님 답변 감사합니다..

그런데, 저는 그냥 apoptosis랑 necrosis만 보려고 하고,

apoptosis protocol 보면 cell 양은 맨 처음 1~5x10^6 cells/mL를 얻은 다음

1~5x10^5 cells/100uL를 사용하고

염색을 다 하면 sample 총량이 500uL가 되는데도 부족할까요??

제가 직접 하는거면 sample 양에 문제 있겠지만

전문가에게 의뢰하는 거라서요..

그리고 seeding할 양만 잘 계산하신다면

3x10^5~1x10^6 cells/mL 정도는 쉽게 얻어지지 않나요??

Facs 찍을 때 cell을 보통 1x10^5개면 신뢰하기 충분하다고 생각하는데. 1x10^5cell/500ul로 준비해가면 이걸 detection하는데 몇분이 걸립니다..세포만 충분히 많다면 1x10^5개 찍는데 20초만에 찍을 수 있어서

그렇기 때문에 적어도 3x10^5은 필요하다고 말씀드리는겁니다. 여유만 있다면 1x10^6까지 준비하는게 facs 찍을 때 편합니다ㅎㅎ

저는 cell cycle 확인하기 위한 목적으로 facs를 보기 때문에 cell harvest 당시 confluency가 ~60%가 되도록하는데 그러면 1well만으로는 세포가 부족하더라구요. 만약 그런게 상관이 없어서 harvest하는 당시 세포가 confluent하다면 경우에 따라 1 well로도 가능할 것 같습니다.