[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보  |  e브릭몰e브릭몰 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
랩박스 - 형광 이미징의 모든 것
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3
과학으로 본 코로나19 (COVID-19)
전체보기 안전점검 논문교환 LABox
 전체 > Molecular Biology-RNA > mRNA Analysis
조회 465  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 RNA추출 과정중 heatingblock 55도 가열 이유
올챙이토짜(대학원생)  |  04.08 13:29

안녕하십니까 초보대학원생입니다.

 

여러가지RNA 추출 프로토콜비교중 

 

75%ETOH washing까지 맞춘 뒤에 건조 후 DEPC나 RNase free water 첨가 후 heating block 55도 가열 하는 곳도 있고 안하는 프로토콜이 있어서 여쭤봅니다.

 

heating blcok을 하는 이유좀 알수있을까요?

#RNA
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  04.08 14:00  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

spin column의 경우 elution 효율을 높이려고 하는 것입니다.

37도 정도 heating해도 충분합니다.

manual로 prep.했을 경우 마지막 단계에서 heating하는 것은 별로 의미가

없습니다.

heating 후 cooling하면 즉시 가닥 내 결합이 다시 형성됩니다.

개구리seraphina  |  04.08 14:45  

+ RNA의 dimer, hairpin구조 등 2차구조를 풀어주기 위함입니다.

 

꽃개구리느림보  |  04.09 10:48  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

"여러가지 추출방법 중"이라고 하셨으니, 대충 짐작컨대 crude total RNA를 알콜 침전시킨 후에 용해도를 높이기 위한 목적인 듯 합니다. 식물이나 균류의 total RNA를 추출하는 CTAB 방법이 대표적입니다. CTAB 버퍼로 추출하고서 DEPC water나 SDS를 저농도로 첨가한 SSTE 버퍼로 50-60도로 녹이기도 하는데요, 시료에 고분자량의 불순물이 많이 들어있으면 RNA가 그 복합 침전에서 잘 녹아나오지 않아서 그렇습니다. 그런데 개인적인 경험상, 실온의 DW대신 50도를 처리했을 때 최종적인 수율에 이득이 적었습니다. 오히려 품질(260/230)이 더 나빠지는 경우가 있습니다. 결국은 시료와 추출방법에 따라 효과를 시험한 후에 가부를 결정하는 것이 좋을 겁니다. 

 

답변하기
할인행사 광고 검색광고
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
nanoString Panel Discount Promotion (~6월15일까지)!!! (6.16까지)
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
[TECAN] Reading과 형광 Imaging을 하나의 장비로 한 번에!! [Multi-mode mic.. (6.20까지)
케이비티 케이비티
[KBT] Rotator, Thermo Mixer, Ultrasonicator, Stirrer 등 기본 실험.. (6.30까지)
셀레믹스 셀레믹스
BTSeq Contiguous Sequencing 서비스 런칭 이벤트 - 무료 분석서비스(1만 마일리지) 제.. (6.30까지)
에펜도르프코리아 에펜도르프코리아
[에펜도르프코리아] Eppendorf 2020 상반기 프로모션 안내 : 실험실 필수품 피펫,원심분리기,PCR.. (8.8까지)
프리미엄 등록안내
외부제휴사 광고 AD
e브릭몰
6/6  좌우
93,20088,600
79,50075,600
493,000443,700
52,60050,000
870,000
49,00041,700
139,000132,100
125,500119,300
66,50063,200
924,000
370,000333,000
739,000702,100
468,000421,200
109,00098,100
47,20044,900
17,00014,500
92,30087,700
482,000433,800
136,000129,200
482,000433,800
23,00019,600
6,0005,100
773,000734,400
339,400322,500
최근등록   더보기 >
막단백질 정제 중 detergent를 어떤 식으로 제거하나요???   06.03
세균 성장곡선 측정   06.03
미생물 균주 분양 요청   06.03
Hs27 cell 분양 가능하시거나 국내 구매처를 알고싶습니다   06.03
LC-MS/MS column 사용시   06.03
HMC-1셀에 PMA처리 결과좀 discussion 부탁드립니다!   06.03
media 교체 시 PBS washing   06.03
마우스 실험관련   06.03
고체배지에 휴대폰균을 배양하여 육안으로 보이는 것이 정말 휴대폰에 있는 세균이 맞나요?   06.03
Sumo 정제   06.02
그린메이트바이오텍
ZEUS
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ  |  실험 문의 및 제안
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의 member@ibric.org
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
머크