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 전체 > Molecular Biology-Protein > Expression/Purification
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질문 protein expression 할 때 scale up시, 항생제 없이 진행하기도 하나요?
개구리클레엉(대학원생)  |  04.07 14:20

안녕하세요.

BL21(DE3)PLySs 에서 recombinant protein expression을 주기적으로 하고 있습니다.

저희 연구실에서는 inoculation, scale up 시 모두 selective antibiotics를 사용하고 있습니다.

하지만 method를 찾다보니 scale up 할 때 항생제를 안넣는 경우도 종종 보았고 thermo 사의 홈페이지에서도 그렇게 언급이 되어있더라구요.

E coli에서 단백질 뽑을 때 small scale 에서는 항생제를 넣는건 당연하지만(장시간 키우는 거니까), scale up 할 떄는 단시간이고(3-4시간) 이미 selection이 되어있기 때문에 그렇게 해도 되고 오히려 대장균에게 항생제라는 스트레스를 빼주는 것이기 떄문에 단백질을 더 많이 많든다고 하던데, 이게 맞는지 궁금합니다.

#protein expression
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  04.07 15:01  
small 과 large scale 단백질 생산은 시간차이가 아니라 배양규모인데 시간 차이가 나는 이유가 있나요?
개구리클레엉  |  04.07 20:03  

아 제가 말을 잘못했어요ㅠ small scale= 라지로 올라가기전에 inoculation, 즉 start culture 하는 것을 의미했습니다!

대왕개구리SPEED  |  04.07 20:12  

bacteria의 stress 측면에서 보면 ITPG induction 또한 stress입니다.

짧은시간 배양할 때는 large 또는 small scale induction 시 항생제를 넣어도

되고 안넣어도 무방합니다.

배양 시간이 길어지면 copy number가 줄어들기 때문에 항생제를 넣는것이

좋습니다.

개구리클레엉  |  04.07 21:20  

넵! 감사합니다!!! 

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