실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Expression/Purification
Ni-NTA 칼럼 비드의 맥시멈 사용횟수는 어떻게 될까요?
레벨5 클레엉 (대학원생)
이전 질문에서 기존에 쓰던 칼럼말고 다른 칼럼으로 바꿨었는데(이유: 단종되어서) 실험이 잘 안되는듯 하여 다시 원래 칼럼으로 돌아가볼까 하는 생각을 가지고 있는데요, 궁금한 부분이 있습니다.
기존에 쓰던 Ni-NTA칼럼을 매번 스트리핑하고 리차징하여 사용했었습니다만 약간 효율이 떨어지는거같아서 새로운 Ni-NTA 칼럼으로 옮겼었는데요, 혹시 기존 쓰던 칼럼의 재사용 횟수가 몇번이나 될지, 그리고 완벽히 다 스트리핑(비드와 비드 사이의 잡 단백질까지...!) 하려면 어떠한 조성의 버퍼로 비드를 청소해줘야할지 궁금합니다. 현재는 100mM EDTA, 0.5 M NaCl, 20mM Tris HCl의 조성의 버퍼로 스트리핑중에 있습니다.
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