실험 Q&A Immunology > Immunocytochemistry
NO assay 프로토콜에 따라 같은 물질이어도 차이가 많이 날수 있을까요?
레벨4 soi (대학원생)
직접 NO assay를 해본 적은 없고 다른 연구소와 cowork으로 항염 활성을 평가하고 있습니다.
그런데 첫번째 연구소과 두번째 연구소에서의 활성이 많이 다릅니다. 비교해 보면 정말 큰 차이는 없는데,,,,제가 프로토콜을 분석해본 결과 다음과 같은 차이가 있습니다. 물론 다른 cell 상태, LPS 상태도 다를 것이라 생각됩니다.
1. 96well에 6만개 RAW264.7cell, LPS 100ng/mL
-NO 생성 저해능100ug/mL에서 65%
2. 96well에 10만개 RAW264.7cell, LPS 1ug/mL
-NO 생성 저해능100ug/mL에서 20%
입니다. 상당한 차이가 있는데요..
혹시 LPS가 10배 차이가 나는데, LPS 대비 샘플의 농도가 낮아서 효능이 낮게 나올수도 있을까요?
그리고 phenol red있는 DMEM을 사용하는 경우, griess assay에 크게 영향을 미치나요? control, +LPS, +LPS+ 샘플 모두 같은 조건이니 괜찮지 않을까요?
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