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 전체 > Molecular Biology-Protein > Western Blot Analysis
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질문 Carbonic Anhydrase 에 대하여 여쭙습니다.
알과학상자(과기인)  |  04.01 11:41

실험을 하다 궁금한 점이 있어 여러 선배님들의 고견을 여쭙습니다.

현재 Standard Sample(이하 Std) 을 통하여 여러 Test 를 진행하고 있습니다.

몇 가지의 Std Sample 을 찾다 원하는 분자량을 지닌 Carbonic Anhydrase (29kDa) 라는 Std 를 찾아 분석 중인데 Monomer Dimer 등의 다양한 형태로 존재하고 있었습니다.

Purity 가 의심스러워 SDS-PAGE 를 진행하여보니 하나의 밴드가 아닌 3개 정도의 밴드가보입니다. ( 물론, 원래 Target Size 의 밴드가 가장 진하긴 합니다. )

 

질문 드릴 내용은 이렇습니다.

1. Std Sample 이 이렇게 Monomer 단독으로 존재하지 않는 경우가 있는지

2. Powder 를 희석하여 사용하였는데, 혹시 보관상의 문제일 수 있는지

3. 혹시 Carbonic Anhydrase 특유의 성질이 있다면 (예를 들자면, 상온에서 매우 불안정하다는 등) 도움을 구하고 싶습니다.

선배님들의 노하우를 여쭙습니다.

 

이상입니다. 

감사합니다.

#SDS-PAGE
 
#Protein
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  04.01 12:17  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

1. Std Sample 이 이렇게 Monomer 단독으로 존재하지 않는 경우가 있는지

: 어떤 실험의 std로 사용하는지 모르겠지만 std와 monomer라는 용어는 아무런

관계가 없습니다.

따라서 std라고 해서 반드시 monomer일 필요는 없습니다.

2. 효소 purity가 생각보다 안좋습니다.

당연히 여러 band가 보입니다.

3. 효소, 단백질의 실온 보관은 피하는 것이 좋습니다.

알과학상자  |  04.01 13:13  

SPEED 님의 답변감사드립니다.

 

Std Sample 을 Powder 로 제공하는 제품이였는데

Std Sample 이고 29kDa 라는 분자량을 제공하고 있어

표지가 될 하나의 밴드만 존재할 것이라 생각하였습니다.

 

보관은 제공된 정보대로 4도 냉장보관 중 입니다.

혹시 Powder 를 희석했을시

실험 도중, 외부 노출이 문제가 될까 고민이 되어 말씀드렸습니다.

 

말씀해주신 부분에 의문이 해소된 것 같습니다.

많이 배우고 갑니다.

오늘 하루도 좋은 데이터 얻으시길 바라겠습니다.

대왕개구리SPEED  |  04.01 13:58  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

실험 중 외부 노출 정도는 크게 걱정할 문제는 아닙니다.

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